НАБОР РЕАКТИВОВ ДЛЯ ИМУНОРАДИОМЕТРИЧНОГО АНАЛИЗА ПОВЕРХНОСТНОГО АНТИГЕНА ГЕПАТИТА В С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ РАДИОНУКЛИДА 125И (IPMA-HBsAg-125I)
для медицинского применения
набора реактивов для имунорадиометричного анализа
поверхностного антигена гепатита В с использованием радионуклида 125И
(ИРМА-НВѕАд-125И )
Kit of reactants for immunoradiometric assay of antigene superficial hepatites B for use radionuklide 125I ( ИRМА-НВѕАд-125И )
Общая характеристика:
состав набора:
Препарат 125И–антитела к HBsAg ( по 5,5 мл ) с активностью
во флаконе 85-185 кБк - 2 флакона,
положительный контрольный образец HBsAg ( 0,7 мл ) - 1 флакон,
отрицательный контрольный образец HBsAg ( 1,5 мл ) - 1 флакон,
пробирки с имобилизоваными моноклональными антителами - 100 шт.
Фармакотерапевтическая группа. Диагностические радиофармацевтические средства.
Код АТС V-09.
Назначение набора. Набор предназначен для количественного определения наличия поверхностного антигена гепатита В в малом объеме сыворотки или плазме крови человека методом конкурентного имунорадиометричного анализа "in-vitro".
Характеристика набора. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 40x2 исследовательских проб, 6 проб положительного и 14 проб отрицательного контрольных образцов HBsAg (всего 100 определений).
меры предосторожности при работе с набором. Реактив 125И - антитела к HBsAg являются источником мягкого гамма-излучения. Период полураспада радионуклида 125И - 60,04 суток.
При работе с набором следует соблюдать правила работы с радиоактивными веществами (РР) по группе В (Нормы радиационной безопасности НРБУ-97 и Основные санитарные правила противорадиационной защиты (ОСПУ) работы с радиоактивными веществами и другими источниками ионизирующих излучений).
Внимание!
Химическая посуда и оборудование, используемые при работе с РР, должны быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно.
Запрещается при работе с РР иметь на рабочем месте стороннее оборудование и личные вещи.
Категорически запрещается прием пищи, использование косметических средств, курение в помещениях, предназначенных для работы с РР.
В сыворотке крови, использованной как компонент набора, не обнаружено вирусов ВИЧ и гепатита В. Однако компоненты набора следует рассматривать как потенциальный источник вирусной инфекции и использовать при работе с набором одноразовые резиновые или пластиковые перчатки.
Оборудование и материалы, необходимые для проведения анализа:
Полуавтоматические пипетки со сменными наконечниками, позволяющие
отбирать объемы жидкости 0,1; 1,5;
штатив для пробирок;
водоструминий насос;
гамма-счетчик, позволяющий измерять активность изотопа [125J];
лента полиэтиленовая с липким слоем или пленка полиэтиленовая;
дистиллированная вода.
Подготовка реагентов для анализа. Перед началом работы все компоненты набора должны иметь комнатную температуру (+18... +25 ºС).
Проведение анализа.
Пронумеровать пробирки. Необходимое количество пробирок выбрать из расчета:
на положительный контрольный образец - 3 пробирки (пробирки 1 - 3),
на отрицательный контрольный образец - 7 пробирок (пробирки 4 - 10),
на каждый неизвестный образец сыворотки - 2 пробирки (по две на каждую анализовану сыворотку, например, пробирки 11,12. .... 99, 100).
Вставьте пробирки в штатив для пробирок. Вскрыть флаконы.
В пронумерованные пробирки внести с помощью пипетки реактивы; пробирки 1 - 3 -
положительный контрольный образец HBsAg по 0,1 мл в пробирки 4 - 10 - отрицательный контрольный образец HBsAg по 0,1 мл в пробирки II, 12 - 99, 100 - анализовану сыворотку или плазму по 0,1 мл.
Растворы в пробирки вносить, прикасаясь кончиком пипетки к внутренней поверхности стенки пробирки у самого дна. Легким постукиванием по пробиркам добиться горизонтальности уровня жидкости в них.
Закрыть пробирки полиэтиленовой лентой с липким слоем или полиэтиленовой пленкой, которую необходимо прикрепить к штативу тонким резиновым кольцом.
Выдержать пробирки 12-16 часов при температуре 18-25ºС.
Удалить содержимое пробирок с помощью водоструйного насоса с ловушкой для сбора жидкости.
Промыть пробирки дистиллированной водой порциями по 1,5 мл. Операцию промывки повторить три раза, старательно удаляя воду из пробирок с помощью водоструйного насоса с ловушкой для сбора жидкости после каждого промывания.
Вытащить флакон с реактивом 1-антитела к НВѕАд из коробки. Выдержать 30-40 минут при температуре 18-25ºС.
Вскрыть флакон с реактивом 1-антитела к НВѕАд.
Внести в каждую пробирку по 0,1 мл реактива 1-антитела к НВѕАд .
Следить за тем, чтобы весь реактив попал на дно пробирки. Легким постукиванием по пробиркам добиться горизонтальности уровня жидкости в них.
Закрыть пробирки полиэтиленовой лентой с липким слоем или полиэтиленовой планкой, которую необходимо прикрепить к штативу тонким резиновым кольцом.
Выдержать пробирки 4-6 часов при температуре 18-25ºС.
Удалить содержимое пробирок с помощью водоструйного насоса с ловушкой для сбора жидкости.
Промыть пробирки дистиллированной водой порциями по 1,5 мл шесть раз, старательно удаляя воду из пробирок с помощью водоструйного насоса с ловушкой для сбора жидкости. Последнюю порцию жидкости удалить наиболее старательно.
Измерить активность 125I в каждой пробирке с помощью гамма-счетчика. Время измерения –
I минута.
Расчеты.
Определить количество фоновых импульсов - (Nф), регистрируемых счетчиком за I минуту, эксплуатируя счетчик в режиме работы "Измерение" 5 минут (С) без внесения в него радиоактивного образца.
Фон счетчика (Nф) найти по формуле:
Nф= ------- .
5
Вычислить среднее количество (А) зарегистрированных счетчиком импульсов при измерении положительных контрольных образцов в пробирках 1-3 по формуле:
N1 +N2+N3
А= ------------------- - Nф .
3
Рассчитать среднее количество (В) зарегистрированных счетчиком импульсов при изменении активности отрицательных контрольных образцов в пробирках 4-10 по формуле:
N4 +N5+ . . . +N9 +N10
В = ------------------------------------ - Nф .
7
Вычислить отношение А / В. Оно должно быть не меньше 5.
Найти нижнюю границу положительных результатов ( Nm) для исследуемых проб по формуле
Nm = 2,1 В + Nф .
Если количество зарегистрированных счетчиком импульсов при измерении активности в исследуемой пробе превышает размер Nm , то данный образец сыворотки или плазмы рассматривается, если содержит НВѕАд .
Аналитические характеристики набора.
Минимальная концентрация НВѕАд, которая может быть получена с помощью набора, составляет 5.10-9 г/мл.
Специфичность.
Все негативные результаты, полученные с помощью набора, является истинно отрицательными.
Среди положительных результатов анализа возможны "ложно-положительные". Причины "ложно - положительных" ответов могут быть такими:
загрязнение проб материалом позитивных образцов;
радиоактивное загрязнение пробирок;
недостаточное промывание пробирок после инкубации с 125I - НВѕАд.
Предполагается постановка анализа неизвестной сыворотки без дублирования.
Все положительные результаты, полученные при постановке анализа без дублирования, и все случаи расхождений результатов постановки в дубликатах рекомендуется проверять повторной постановкой анализа.
Если при повторной постановке положительные результаты подтверждаются, то их следует считать истинно положительными, а если не подтверждаются - "ложно-положительными" и расценивать как негативные.
Особенности применения набора. Если в процессе эксплуатации набор используется несколько раз, то при каждой постановке необходимо снова провести анализ трех положительных и семь отрицательных контрольных проб и результаты обработать согласно инструкции.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора и квалифицированное проведение анализа.
Условия хранения. Набор хранить в темном сухом месте при температуре 2-8 ºС в течение 45 суток с даты изготовления при температуре до 25 ºС в течение не более 5 суток.
В случае неполного использования компонентов набора возможно их многократное использование в течение всего срока годности при соблюдении условий хранения.
Поставляются только в специализированные медицинские учреждения, имеющие разрешение на работу с радиоизотопными препаратами.
Ключевые слова: набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) инструкция, набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) применение, набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) состав, набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) отзывы, набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) аналоги, набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) дозировка, лекарство набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i), набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) цена, набор реактивов для имунорадиометричного анализа поверхностного антигена гепатита в с использованием радионуклида 125и (ipma-hbsag-125i) инструкция по применению.
